陰離子色譜柱是高效液相色譜儀的重要組成部分,其性能的穩定性和使用壽命直接影響到分析結果的準確性和實驗效率。為確保其安全運行,需遵循以下操作與維護指南。
安全操作:
安裝前檢查:確認色譜柱的耐受pH范圍、溫度范圍和最大壓力,避免超范圍使用。連接色譜柱時,確保管線接口無顆粒雜質,按色譜柱上標識的液流方向安裝,并逐漸增加流量至工作流速。
流動相管理:使用高純試劑和超純水配制流動相,避免使用受到污染的水源。流動相需經0.45μm濾膜過濾,并采用在線脫氣或超聲脫氣,防止氣泡進入色譜柱。
樣品預處理:樣品需經0.22μm或0.45μm濾膜過濾,去除雜質。含有蛋白質的樣品,需先沉淀蛋白質,再經固相萃取柱去除蛋白質和有機物。
操作規范:開泵后保持流量低于0.5mL/min,之后逐漸增加流量至工作流量。避免流動相長時間停流,防止固定相干縮或樣品擴散至柱床深層。
維護保養:
日常清洗:每次使用后,用適當的溶劑清洗色譜柱,去除殘留的樣品和雜質。清洗時控制流速和時間,避免對色譜柱造成損害。
長期保存:長期停用前,用適當的溶劑充滿色譜柱,防止空氣中的氧氣和水分進入。將色譜柱置于干燥、避光的環境中保存,避免陽光直射和高溫環境。
定期檢查:在保存期間,定期檢查色譜柱的狀態,如外觀、密封性等。發現問題及時處理,以免影響后續使用。
再生處理:若色譜柱受到污染,可用組分相同且濃10倍的淋洗液清洗,或使用特定的清洗液(如0.1mol/L草酸清洗金屬離子污染)。